
实验一、DNA的提取与鉴定
注:1、鉴定方法:传统鉴定方法为染色法,只能定性,不能定量,提取的纯度也不祥;改进的鉴定方法为琼脂糖凝胶电泳法,即可看到DNA片段的大小,同时也能看到提取的纯度。2、提取方法:传统方法利用DNA水融法;改进的方法为酚氯仿方法。
实验二、用DNA分子杂交的方法鉴定(人/猴、鸡/鸭等)亲缘关系的实验
注:传统实验室模拟方法鉴定,改进的方法为DNA(RAPD)指纹技术来鉴定亲缘关系。
实验三、亲子鉴定
孩子的遗传特征(标记)是由其父母双方提供的基因组合而成的,从受精的那一瞬间就已经决定了,检验父母、小孩三者的遗传特征,看它是否符合遗传规律,从而可进行亲子鉴定。常见的亲子鉴定方法有:ABO血型检查、DNA指纹分析、STR技术应用。
实验四、DNA身份证
利用DNA指纹图谱技术来制作,该技术就是将该人体组织中微量的DNA提取出来做为模板,用特定的随机引物对其特定区段进行多次复制扩增,使该特定的DNA片段的数量达到可用生化技术方法检测的水平。DNA通过提取、扩增后染色,在电泳胶板上表现出不同数目的清晰的谱带。每个人可以扩增出特定的谱带类型,具有特异性(持证人具有唯一性)。因此,将这种反映遗传物质DNA差异的谱带形象地称为DNA指纹。
实验五、转基因(马铃薯)食品中外源基因的检测
选取马铃薯种属特异性的内源蛋白ptatatin基因片断为内对照,用以检验提取的样品DNA质量,有效避免假阴性并确定检测样品的种源。选取FMV35S启动子、CaMV35S启动子、NOS终止子、NPTⅡ选择基因作为筛选基因,选取外源目的基因PLRVrep、PVYcp作为鉴定品系的鉴定基因,同时筛选出检测以上基因的最佳引物序列,并优化了PCR反应条件。此实验课可选其他转基因食品如玉米、大豆等。
实验六、人/动物基因的克隆
利用PCR技术,克隆人体/动物基因,体外模拟遗传物质的合成过程。如人神经生长因子等基因,动物的肥胖基因等。
实验七、PCR方法诊断疾病。
利用PCR方法检测人和动物疾病是目前非常快速、准确的方法之一。选取一种疾病组织,设计引物,通过PCR方法很快得到检测结果。
实验八、基因突变检测。
主要检测人类家族性的基因突变性传染病:如常染色体显性视网膜变性(RDRP)疾病的视紫红质基因(RHO),应用PCR和直接测序法对ADRP家系进行测序检测突变,会发现该家系的RHO基因在第3外显子序列、第182密码子处发生G→A置换突变,导致中性的甘氨酸(Gly)变为酸性的天冬氨酸(Asp),命名为Gly-182-Asp。目的:使学生了解基因突变及其造成的后果。
实验九、中药材真伪鉴定
采用RAPD法检测可检测“玉屏风散”中的白术、黄芪、防风3味生药,不受样品形态的限制,原药材、饮片、粉末乃至含有生药原型的中成药(丸剂、散剂等)均可应用。
实验十、乳品检测
利用PCR方法可检测乳品中嗜热乳链球菌、保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌、双歧杆菌和干酪乳杆菌等,对乳品质量进行评价。